Posts with the tag 'FCM'
为了更好好的服务科研,我校制定了仪器共享计划及一系列规定,仪器共享网主要的目的是提高大型仪器设备的利用率和完好率,有效调动大型仪器设备所属单位和实验室向全校和社会开放、专管共用,提供优质服务的积极性,满足学校教学、科研对资源共享的需求,并根据教育部《高等学校仪器设备管理办法》和《东北农业大学大型仪器设备管理办法》等有关文件的精神,特制订仪器共享方案,原文地址如下。
东北农业大学大型仪器设备开放共享有偿使用暂行方案(总 则)
仪器共享网地址如下:
http://gzc.neau.cn/yqsbgx/default/Default.aspx
本单位及本人积极响应这一计划,并于今日下午,为兽医学院,利用流式细胞仪测定细胞周期和晚期调亡。由于样品前处理较好,除个别样品杂点较多外,其他数据非常好。对手医学院那位同学做细胞悬浮液的实验技能赞一个。:)
如察看我院共享设备,请查看:
http://gzc.neau.cn/yqsbgx/yqsb/index.aspx?sslb=7
Tags: chromatogram, DNA, FCM, preliminary treatment, 测定
May 31st, 2007
这几天一直给别人做FCM,测定几种草中的DNA含量(pg/2C),一开始还是很明白的,可是随着实验前进,慢慢我也糊涂了,两次的实验结果完全相反,我都不知道哪里错了。重新配置了所有药品,结果都和第一次不一样,可是只有第一次里面有我要的数据啊?难道传说中的偶然?
没办法,找来文章看,确无意间发现,crop science society of amercia期刊居然可以免费下载全文,而且还是SCI索引源之一呢。详见http://crop.scijournals.org/?ck=nck和http://www.scijournals.org/。呵呵,希望这样免费的地方越来越多。
这次测定主要的方法来自”Determination of the level of variation in polyploidy among Kentucky Bluegrass Cultivars by Means of Flow Cytometry“.
Introduce FCM–Flow cytometer
Flow cytometry is an analytical technique that can be used to study many different aspects of cytology and genetics. For expample, it can be use to study the cell cycle by determining the [...]
Tags: DNA, FCM, reference, 测定
April 24th, 2007
细胞增殖需要细胞分裂,一次细胞分裂产生二个子细胞。 最明显的需要复制和分裂变成子细胞的细胞结构是细胞核,它是细胞中遗传物质DNA的贮藏室。 除极少数细胞外,一个有机体中绝大多数细胞包含数量相同的 DNA和染色体。 因此,细胞在分裂前必须复制 DNA,即各子细胞从母细胞承受相同数量的 DNA。
Tags: DNA, FCM, 生物
Continue Reading April 10th, 2007
近日DNA含量、调亡、细胞周期分析的得到的数据都不是很好,经过查阅资料,发现主要问题还在于前处理。
1、染色问题,染色加入足量的染料.以确保样木能与染料充分结合,PI的推荐浓度至少是20 ug/ 10的6次方个细胞。染色液过量与不足,均可造成分析背景过大。
2、由于PI也可以与RNA结合,因此应该用Rnase处理样品,一般的添加量大约是10的6次方个细胞加大约1000U的RNAase,通常将将染液和RANse配到一起,这个浓度也是要探索的,量不对,容易出现异常峰。
3、直方图道数与一倍体细胞的G1峰位置的选择,细胞数直方图的道数值至少应为512,G峰道数应不低最大道数的五分之一即当直方图的最大道数为1 024时.G,峰的位置应该是200.直方图的最大道数为512时.G,峰的位置应为1000通过调节PMT(光电倍增管)的电压值以获得正常一倍体细胞的G峰的理想位置,这点很重要,但是问题是样品的不均一性,细胞浓度不同,导致荧光强度不同,所以出现的值很不好,所以各样本间的细胞浓度值要尽量军均一,否则不能出现想要的图像。
4、一般来讲,收集细胞要在20000个以上,所以细胞悬浮液的量也要足够,在细胞浓度10的6次方个以上时,也大约要500微升。
提供一个新鲜组织DNA分析的材料!右键点击后另存为, 直接点击打不开。。。。。dna analysis of application PI.pdf
Tags: DNA, FCM, preliminary treatment
April 9th, 2007
流式属于负压上样,因此真空泵不工作将导致系统无法进行工作,而真空泵在工作过程中,产生震动容易对周边设备产生影响,尤其是接线板等设施,较易导致他们接触不良。具体解决办法如下:
1、将真空泵固定螺母拧紧,减少震动。
2、将其他设施用结实的绳索固定好,远离真空泵震动范围。
3、选择中低速进样,可减少问题的发生。
Tags: FCM, 故障, 真空泵
March 7th, 2007