高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办？
昨天晚上做色谱到夜里11点，使用的流动相有盐，而且明天就要做蛋白，因此想把柱子好好洗洗，于是设定上程序，先1ml，然后改成0.2ml，走到明天9点，设置好后，看了看流动相，感觉足够了。于是骑上我的宝马车回家转。半路上还想，把1ml洗的时间设定长点好了，反正余下的流动相足够了，留着也没用。因为太晚了，就没有回来改。
晚上看《创业的艺术》看到凌晨4点，早晨9点起床，9：30到了实验室，先进色谱室把计算机叫醒，然后开办公室，在折回色谱室，看计算机还没醒，起身看看流动相。倒吸一口冷气，流动相瓶空空如也！看机器屏幕上，居然还以1ml的速度走着！赶紧设定成零，回头看计算机，摇了半天鼠标，居然跳出一个说明“致命性错误，失去数据库链接”，大概是计算机和仪器的通讯出了问题，难怪一直保持1ml的速度。坐在椅子上安静了一会，祈祷了一下上天不要把我的输液泵的石英杆搞坏—–这就彻底完蛋了。怎么办？看了半天说明书，差了半天资料也没有和头绪。书上说：流动相不足时会自动停泵。妈的，我这怎么没停啊？仔细想想，应该问题也不大，顶天密封会有些问题，根据估计，没有流动相的时间也就2个小时左右:(。想咨询下工程师，还没联系上。又仔细想想，自己解决吧。
1、Dry Prime，呵呵，既然流动相都干了，那流路大概也干了。
进行dry prime的操作步骤如下
1. 轻轻振摇溶剂瓶中的过滤头以除去可能留存的气泡.
2. 在灌注排液阀出口插上一支注射器, 然后打开排液阀(反时针旋转半
圈).不要将注射器固定在排液阀上,而要用手将其贴紧阀的出口.
3. 选择 Dry Prime, 然后按 OK.
4. 按屏幕上你想灌注的相应的流路(A,B,C,或D)键.
5. 用一只手握住注射器,同时用另一只手抽注射器的杆,使针筒中产生
一段让流路中空气逸出所必需的真空.
6. 重复此操作直至排液口有溶剂流出.这可能需要几分钟时间,特别是
当在线脱气机也同时在灌注时,时间会更长.
7. 重复上述操作将4个溶剂通道全都充满溶剂, 然后关闭排液阀.
2、Wet Prime，看来柱塞杆那个宝贝没有问题，接着给我干活，呵呵！
进行dry prime的操作步骤如下 1 轻轻振摇溶剂瓶中的过滤头以除去可能留存的气泡.
2.输入用于 prime的流速和持续时间(所用的溶剂组成
是在 Status 屏幕中输入的), 然后按 OK. 溶剂管理
系统开始运行. Prime的持续时间取决于安装在
2690上的选件.
选件 流速 (mL/min) 持续时间(min)
真空脱气机 7.5 6
氦气脱气 7.5 2
3.到达指定时间后流速停止,2690 回到 Idle 状态.
3、走流动相看看，一开始，压力低的不正常，我想，大概是有气体所致，柱子里面应该没有干，因为没有流动相了，空气不可能将色谱柱里面的液体压出去，先用小流速看看，然后逐渐加大流速，呵呵，压力上来了，看来一切正常啊！
4、回头检查了一下泵的密封，没问题！
5、晚上终于联系上工程师，说了一下自己的处理过程，哈哈。VERY GOOD，没有问题！！
虽然没有什么事情，可是还是吓出一身冷汗，关键是怕柱塞杆和密封出现问题。这都是很麻烦的问题，以后一定注意。解决了问题，心里很是高兴，今天的实验又是非常的顺利，样品比标准样品跑的还好，真是高兴。今晚能早回家了，写下问题，与遇到问题的同仁共同积累经验！
呵呵，看来实验室还是老样子，要是有专人操作和维护，你们的日子就好过多了