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乳品科学教育部重点实验室手册

2007年12月27日 没有评论

正如我们无法预测我们的未来,你也和我一样不清楚你即将进入的乳品科学教育部重点实验室(以下简称实验室)是什么样子。和你一样,我刚开始的时候对自己的课题充满了憧憬,但是不知道如何下手。在这里,我要告诉你的是:

第一,你为什么来到这里?—虽然这很容易回答,但是你的答案大概连你自己都有些茫然。就如回答这个问题一样“你当时为什么考研?”

第二,你来这里做什么?

第三,你来到这里怎么做?

第四,实验室能做什么?

后两个问题大概你从你的导师那里已经得到了一部分答案,但是这里,我要告诉进攻最大那个山头之前,你要先攻克那座山头,我还要告诉你,如何攻克大小不同,形状各异的山头。

最后,我要声明,你首先作为一个年满18周岁,对自己的行为具有辨别能力……(宪法1999条),简短的说,你应该是一个对自己完全能够负责的人、一个诚实的人。你因此而被准许进入实验室,而本文所有的文字均基于此基础—就如基于你识字的基础。另外需要说明一点,本文并非规章制度的汇总,而是这些规章制度的基础和具体的措施。

第一章 一些基础的东东

就如所有复杂的社会组织一样,实验室有自己的习惯和规则,问题是我们从来没有听到或者注意这些规则。你需要分析很多杂乱无章的线索,成为一个合格的成员—一个圆满完成课题的研究生、一个即将展翅而起的博士后、一个根值实验室的科研人员,在这个体系中,并不是所有人都能与你清晰愉快地交流、并不是所有事都如你设想般水到渠成。但是,相信自己,一段时间后,你会处理一切,与其他人一起进行科学研究的乐趣会取代你起初混乱的感觉,除非你根本就不喜欢科研。你会学会与别人协调工作,比如公用同一台设备或者仪器;你会学会不断完善你自己的课题,比如发现你课题中的瑕疵;你会学会基础的实验技巧,比如试验设计和具体的实验手段;如果你肯用心,你甚至会学到很多世界上最精密仪器的秘密–我们实验室完全能够提供给您这样的条件。

你知道盲人摸象的故事,故事的主旨就是告诉大家,从不同的角度看问题,会有不同的结果,而仅从一个角度看问题,也肯定是不对的。因此,你听到的对我们实验室的任何评述,无论好的还是不好的,都仅仅是一方面;另外,你也知道刻舟求剑的故事,所以你应该知道无论现在我们实验室存在什么样的问题,问题会得到解决。只要有各位的支持,就有实验室的发展。

1各位和实验室是何种关系?

无论对人还是对事,首要是理顺关系,其次就是定义权利和责任。各位与实验室,就如兵对于兵营,学生对于学校的关系,你参军,你入学,表示你要遵守学校和部队的各种制度,各位来到实验室,就要遵守实验室的规章制度。各位应该认识到这一点,包括各位导师也要认识到这一点。也如兵营和学校属于国家,我们实验室也先属于学校而后属于国家。各位到这里来学习和科研,自身增长了知识和能力,为实验室提供了赖以发展的智力资源。你们依靠得到的知识和能力在这个社会上谋生,实验室依智力资源为平台进一步发展,吸引更多的人才,获得更大的科研成就。而所谓国有国法,家有家规,所谓没有规矩不成方圆。重点实验室也制定了一些规则,而这些规则的目的是为所有科研人员创造有利的环境,而不是为某个人创造有利的环境。当然,诸位的不同角色也是这种关系有些微妙的变化,但是总结来讲:实验室对于任何人,从普通实习学生到固定科研人员,无论来谋求学位还是谋求工作与生存,实验室都可以看作一个平台,一个组织,有既定的方向和规则的组织。

前面一段话读起来似乎有些冰冷并不近感情,其实就我来讲是不愿意这样写的。因为我知道各位是实验室是有感情的,而不论你在实验室度过的时间是否愉快。你们的时间、你们的快乐、你们的笑声、你们的喜怒哀乐都以时间为横坐标,感情为纵坐标刻画在你的试验台台上、你用过的玻璃器皿上。这样讲又似乎有点煽情有点不适合这科研严谨的思维。那我们在换一种说法。

各位都很年轻,都是所谓的11点半的太阳,沿着你自己的生命轨迹飞扬在这个多姿多彩的世界里。很荣幸的是,在你热度最高的时候来到实验室。你的那份激情、你的那份独有的创意都将为试验室带来微小但意义重大的进步。所以实验室值得你去怀念,你们也值得实验室纪念。

2实验室各位工作人员都负责什么样的工作?

实验室的各位工作人员,无论负责什么,其权力都源于他的职责。那就是监督和服务。监督所有进入实验室的人员按照既一定的原则活动,这是实验室长久运行的基础;服务所有进入实验室的科研人员,记住,是服务所有的科研人员,这句话的关键词是科研人员。这有一种例外情况,如果你已经申请进入实验室并获得批准,但是并没有开始你的科研活动,那么你不能列入实验室工作人员的服务范围。但是,他们要监督你,监督你的行为符合实验室的要求。也许你看来这个答案有些答非所问,不要着急,解决了这些基础问题,后面的细节慢慢向你展开。

3实验室各项制度如何制定?

我们要建立一个创新型的组织,这注定我们不会采取严格的管理。实验室所有的制度的制定和修改都由实验室的科研人员制定而通过实验室统一发布。有时候不是全部科研人员,我们不得不采取少数服从多数的方法。

4实验室的科研人员有什么权利与责任?

在实验室你将是自由的,你的权利就是自由的实现你的思想,你有使用实验室任何一台设备和仪器的权利—–当然为了让这些仪器高效的运行,在你使用某些仪器的时候,需要办一些相应的手续和我们对你进行相应的培训和考核,以保证您具备操作仪器的能力。你有建立和改进实验室管理制度的权力。你的责任源于你的权利,你要遵守实验室于你有关的任何规定,无论你认为规定是否合理,你都必须遵守。所有的制度都以实验室发布的为准。这听来和上一条有些冲突吗?不,你有权改进制度,必须是在实验室通过大多数讨论通过你的改进建议并重新发布后,你的权利在这里得到体现。而非任意践踏实验室的各项制度,如果你不幸这样做了,那么,后果很严重。

明确了以上问题,也许你已经知道你为什么要来这里,很显然,是因为您选择了这条路。

5在实验室如何开始你的科研的第一步?

很高兴各位读到这里,如果您打算在实验室进行科学研究以达到你得目的—-比如你的目的是毕业,甚至是得诺贝尔奖。那么抱歉你还要仔细的读一读这一章。为了各位方便,我对“你们”—-各位即将在实验室开始科研者,进行了分类。分类的原因是我们针对不同的科研者,制定了不同的制度以方便你们的科研。分类如下:

第一种,实验室各位首席专家及负责人的科研协助者。

第二种,相关学科要利用实验室科研条件者,包括博士后、访问学者等。

要说明一点的是,在实验室进行科研指在实验室完成你试验方案的大多数,如果您仅仅短期使用实验室的某种共享仪器,欢迎您直接读第二章。

5.1实验室各位首席专家及负责人的科研协助者

你们的导师因为其学术成就受聘于实验室担任某方面的工作或作为实验室的固定成员,因此排除特殊情况,你们都要在实验室协助自己的导师完成其科研任务。在此期间,你的导师将对你进行指导,无论是科研还是生活。你的所有学术成果都和你的导师共同享有并归实验室所有。以下分步列出了您进入实验室程序及需要填写的文档。

你的导师同意你进入实验室并向实验室推荐。

此时,你需要填写一张进入实验室的申请单,下载地址如下:填写好后,交到207和211办公室各一张。这意味着你已经进入实验室,但如果你不开始科学研究,那么你依然不能算作科研人员,此时你能利用的资源如下,a、202、204或者209中的计算机位置。b、跟随你的师兄或者师姐,当然也有可能是师弟或者师妹熟悉实验室。下面为画图向您说明。

最重要的是,你的导师根据学校的相关规定或者直接认同你可以在实验室展开科学研究并向实验室提出进行科学研究的申请。

5.2相关学科要利用实验室科研条件者

如果您仅仅是要使用某个仪器,那么您不在此列,我们有相关的仪器共享规定。归为此类的是要在实验室度过大部分科研时间的人员。比如您申请下课题需要在我们这里完成,比如我们的科研环境恰好适合您的科学研究。如果您属于此列,那么您最好和我们实验室的主管协商这件事情,这时你要和他将已将您的科研背景,目的及采用的方法,当然别忘了协商知识产权及费用的问题,因为可能以后填表格时要用得到。如果他允许您进入实验室,那么看下面的图。

1、到实验室网站下载“外来人员申请进入实验室”的表格

2、填写表格并让你的导师和要进入的研究部负责人签字。

3、交给211和207实验室

4、完成任务!实验室将发给你记录本及门卡等证明你身份的东东,还有一个署您名字的实验台。

第二章 实验室共享的有关规定

科学研究最终要为公众谋福利,我们的实验室也一样,我们拥有的仪器和设备大部分都对外开放,但是我们要收取一部分费用,目的是收回运行成本以保证仪器持续运行,这包括仪器本身和人员费用。为了更清晰表述,我也用表格来说明。

1、到实验室的网站的网站下载“仪器使用申请”的表格。注意:每个贵重仪器均有自己的申请表。

2、填写表格并让你的课题负责人签字。

3、交给211办公室。

4、无论是否得到批准,我们都会主动和您联系。

通过以上步骤,如果您得到批准,那么我不得不和您说明一些其他的问题:首先,您在填写申请单的时候,您需要写上您检测样品的制备方法,这首先是对您负责,其次是对我们负责,因为只有经过科学处理的样品检测后才能得到科学的数据。也只有经过合适处理才能保证您的样品对我们的仪器不造成损害。所以请您如实填写,如果样品的处理过程涉及到您的知识产权,请您和我们协商,我们很高兴为您的科学成果贡献绵薄之力。

如前所述,我们在您使用我们的仪器的时候要收一些费用,但这不是我们的目的。如果您的样品特殊,无法按我们的收费标准计量,那我们将通过协商解决问题。

第三章 我们的组织过程

一个人,如果要真正明白什么道理,哪怕是最简单的道理,只有一种办法,那就是亲身经历,别人说的再透彻也没有用。比如“慈母手中线,游子身上衣”,也只有你远离父母甚至自己做了父母之后才能真正体会。然而,下面我要讲的都是些教条的东西,所以我更加担心自己的语言能力,这心情就如捧着和氏璧去献给秦王,胆战心惊的怕被杀头,不是怕别的,而是怕秦王不识真玉。

我们实验室的研究方向有。。。。。。。。。。。。。。。。。。。,分类来看,是两种实验室,其一是生物实验室,其二是理化分析检测实验室。我的目的是分别阐述这两种实验室的特点,这是从这里到第六章我要阐述的内容。而在这儿,我先要讲他们共同需要的组织过程。

实验室人员,实验室的组织机构更倾向于水平管理,这意味着每个人都是平等的,没有谁的工作是专门教你怎样做事。也不能认为谁的经历比你少,就能够命令他为你做事。实验室有为之工作的不同人员,由于不同的义务和各种原因聚在一起,这些人员包括:

主管研究人,这个人是实验室的领导,他可能将更多的时间花在管理任务上,如写项目申请或研究报告,而不是做实验室的具体工作,但是他却是实验室内大多数项目的智力支持。他直接或间接地为实验室的研究基金负责,整个实验室的气氛-友谊或者恶性竞争-都依赖于其人格魅力和领导能力。毫无疑问,我们主管研究人是霍贵成教授。

首席专家,这些人是实验室各个研究方向的领军人物,他们对他们的研究方向负责,包括申请课题与管理在这个方向上的研究者。他们对从事其方向的研究者提供智力和经济支持。

研究生,是指为了获得硕士或者博士学位而在实验室工作的人,他们工作时间长,有充裕的时间和饱满的热情来进行它们的项目,在实验室工作2-5年后,他们将更加独立。这也是体现实验室培育人才的一个重要事实。

本科毕业生,是指为了获得本科学位而在实验室学习的人,他们的目的在于通过实验室的锻炼在自己的专业方向上更进一步,为他们以后的工作和学习打基础。他们工作时间短,论文的水平也较低,大多数情况下是从事科研的研究生代其导师进行指导。

监督和服务人员,我们正在完善一种制度,这种制度为每个科研者提供最大程度的自由,但是,世界上没有一种制度不需要监督,我们也如此。监督的权利产生了服务的责任。笼统来讲,所有在实验室工作的人员都同时即是监督者也是服务者。而具体的讲,所有实验室的固定工作人员均为监督者和服务者的执行人。

博士后和访问学者,这些人的到来证明了我们实验室达到了某种高度,这是我们很高兴看到的,同样的,他们也作为我们重点实验室科学研究的中坚力量,但是这并不意味着他们享有某些特权,他们和所有的科研者一样,遵守我们约定的互惠互利的规则。

我们,包括即将在这里开始科研生涯的你,共同组成了我们的实验室,我们是实验室的灵魂、是实验室的主人。很幸运我们能够一起工作和学习,所有上面讲述的道理也只有你进入实验室后才能有切身的体会,下面我告诉你一种迅速体验我们组织过程的办法。

首先请你了解您处于我们组织的那个分类里,由此而承担什么样的任务和

仪器工作站如何防治染毒及如何进行远程控制

2007年12月13日 2 条评论

装备工作站的仪器存在一个比较棘手的问题就是如何进行工作站的杀毒,常常因为工作站不能联网,而导致即使安装杀毒软件也不能更新,导致杀毒失败。有的地方的解决办法是禁止插拔U盘,这有些因噎废食的意味,显然不可取。目前病毒猖獗,虽然常见病毒都是小儿科级别,但是如果中了蠕虫类病毒,就会导致系统运行越来越慢。更为恐怖的是如果你的工作站后台是数据库,如果感染数据库病毒,那我们的很多数据都会变得乱七八糟。经过一段时间摸索,我总结的经验如下:

1、随时备份数据,将有用的数据及时分析。当然,这招是下策;
2、比上面更先进的办法,就是安装还原卡,但是这不适合后台为数据库的软件,如各种液相、气象工作站。比较适合原子吸收、分光光度计、流式细胞仪或者real-timePCR。建议选择小哨兵还原卡,安装和卸载都很方便,我们单位用地就是这个。
3、安装杀毒软件,这也不能算作上策,魔高一尺道高一丈,杀毒软件有时候倒不起作用,反而还会出现很多莫名其妙的毛病。但是考虑到我们仪器工作站与外界接触少,这个方法还是可行的,但是更新病毒库是很难解决的问题,第一仪器工作站上网是个难题,第二把每台机器安装上正版杀毒软件,虽然没有几个钱,可是却很难说服老板买杀毒软件。

下面要说的问题是仪器工作站远程控制的问题,远程控制有什么用?可以让你在办公室就可以控制仪器的运行和数据处理,让你远离实验室有毒有害得环境,还能让你在操作仪器的时候不耽误自己的事情,比如现在,我就在一边控制仪器一边在写博客。有些仪器工作站带远程控制功能,不过大多数都没有。即使是带远程控制功能的工作站,比如戴安的变色龙,但是设置起来比较麻烦,如果你有分光光度计、流式细胞仪或者real-timePCR,HPLC、GC的话,你很难把他们整合到一个平台(一台电脑)上控制它们。其实有很简单的控制方法,而且顺带把工作站感染病毒的问题也能解决了。经过本人摸索,适合WinXP以上所有操作系统安装的工作站,其实Windows98、Windows Me也可以用,鉴于这两种系统太少见而且还要安装软件,麻烦,这里就不讲了,有感兴趣的可以直接和我联系。下面听我慢慢道来,非常简单。

利用MSTSC,呵呵,不知道MSTSC是什么?Follow me,在一台WinXP以上微软操作系统的机器上,点击开始/运行/输入MSTSC回车,出来了吧,呵呵,就是这个,远程桌面连接,还不明白或者想深入了解下,自己Google之。下面继续。

要想用这个远程桌面连接,首先你的工作站要联网,找个交换机(现在便宜的很),良好距离,掐几根网线—不用你亲自动手,到电子城和老板说要几米网线,让他给你掐好。把你办公室的电脑,和实验室的工作站都连起来,然后把仪器工作站点IP地址改成你办公室电脑一个网段的IP,比如你办公室是192.168.1.X,那你就在X前后左右选择数字就可以了。联网这个问题还要具体问题具体分析,如果你办公室和实验室较远,你还要进行布线,不过距离300米以内都没有什么问题。如果你的工作站分布到不同的实验室,那你就要更麻烦了,要把每个工作站加上你办公室的电脑连接成一个局域网。有可能你需要在办公室的电脑上安装两块网卡。这样才能让你办公室电脑即不耽误上网又不耽误控制仪器。而且还能让你在仪器室里也可以随时上网冲浪。网络安装完成后,互相之间都可以ping通,你的工作基本完成一半了。在仪器工作站的电脑上,点我的电脑/属性/远程/把那个“允许用户远程连接到此计算机”前面那个四方框勾上。然后到控制面板里,把用户名加个密码。办公室电脑和工作站电脑相同设置。设置好后,在办公室电脑上点击开始/运行/输入MSTSC回车,点选项,在计算机一栏输入你要控制工作站的IP地址,用户名写工作站Winxp的用户名,密码是工作站登录用户名的密码,勾选上下面的保存密码。然后点连接。你也可以点下图红圈中的另存为按钮,把这个链接保存,这样就不用你每次都输入用户名和密码及IP地址了。连接后,就登陆到工作站计算机上了,你是要杀毒啊还是要运行工作站上的软件控制工作站啊,随便了。

呵呵!
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分享博客话题、激发博者灵感

2007年12月3日 1 条评论

这是这是由 sofish 发起的博客串联活动,主题是:分享博客话题。这和普通的博客串联不同,别的仅仅算作命题作文,而Sofish居然要让大家写思路,狠!呵呵!

我分享的5个话题是:

话题一:

《如何提高你码字的能力》

  • 注意佳词美文的积累;
  • 打腹稿,打草稿,反复修改;
  • 借用他山之石;
  • ……

建立此话题的原因:大家都注意到技术上,似乎很少人注意一片语句通顺风趣幽默的博文是怎样打造出来的。我开博其中一个目的就是锻炼自己的文字。而好的文字是文章的核心,好的文章是好博客的灵魂。

话题二:《博客之痒》

  • 是谁开启了博客之门?
  • 写博客能给你带来什么;
  • 写博客浪费的时间值不值;
  • 我写博客的失与得;
  • ……

    建立此话题的原因:很多博客关注博客技术、博客赚钱、博客技巧,可没有人关注博客中的人,博客技术为博客所用,到底有什么用,用之为何?有何收获?博客是一种技术还是一种文化,是谁开启了博客之门?为什么今天开始流行博客?

    话题三:《未知的味觉》

  • 吃什么也是一种流行吗?
  • 是什么引导了人们的味觉?
  • 味觉能带给我们什么?
  • ……

    建立此话题的原因:我一直在思考一个问题,我们吃什么到底有什么来决定?是什么决定我们明天吃什么?是味觉,是神秘而未知的味觉引导我们…..。

    话题四:《谁动了我的数据》

  • 态度 ;
  • 仪器零距离;
  • 工作站零距离;
  • 你测试什么中的什么;
  • 好看的数据漂亮的图;
  • 你问我答;
  • 建立此话题的原因:这是我提纲列的最晚张大一个话题,也是我已经开始动工的话题。初衷是让那些当年和我一样迷惘的研究生提供一点帮助。

  • 话题五:《博士是怎样毕业的》

  • 入学;
  • 制定课题; 
  • 思考课题;
  • ……;
  • 建立此话题的原因:记录我自己的博士经历,和别人分享,博士在读,提纲在拟!

    P.S. 很喜欢参加别人组织的博客活动,这也源于我这个人喜欢团队作战的个性。我喜欢联合,也许因为我太羸弱。感觉参加的博客中,很多人订阅数和访问量远远超过我,这概因为我的博客介于专业和大众之间(大概没有几个人会看我写的仪器维护和应用方面的文章),我曾努力的寻找这样一个平衡点,后来慢慢的放弃,这是我博客成熟的一个过程。

    这次sofish还给出了竞赛的奖品,这一开始的确成为我没有很快参加的一个原因,因为我知道,这是一场实力悬殊的比赛,从订阅数和内容上来讲,我的博客是不容易被人注意,不容易引起别人的兴趣。既然知道自己会输掉,那何必参加呢?这就是我做事的方式,最后认真写出这篇博文的原因,源于自己对这次活动的热心吧,说不在乎奖品,的确是废话。不抱着竞赛的精神参加比赛是对比赛的侮辱,而知道自己失败,还抱着竞争的精神参加比赛,是不是觉得有点矛盾?好吧,就用这段矛盾的字结束这次活动吧!

    对了,应该把sofish写的博文贴到这里一点:

    “你还因为找不到博客素材而无法继续博客吗?或者有很多想法,却没有时间去书写呢?无论是属于那一个,今天幸福收藏夹为你准备了一个活动,而且准备了一些小礼物,来激发找不到素材的你,来鼓励有很多想法却没时间写出来的你。”

    高效液相(HPLC)流动相走干了怎么办?

    2007年9月16日 1 条评论

    昨天晚上做色谱到夜里11点,使用的流动相有盐,而且明天就要做蛋白,因此想把柱子好好洗洗,于是设定上程序,先1ml,然后改成0.2ml,走到明天9点,设置好后,看了看流动相,感觉足够了。于是骑上我的宝马车回家转。半路上还想,把1ml洗的时间设定长点好了,反正余下的流动相足够了,留着也没用。因为太晚了,就没有回来改。

    晚上看《创业的艺术》看到凌晨4点,早晨9点起床,9:30到了实验室,先进色谱室把计算机叫醒,然后开办公室,在折回色谱室,看计算机还没醒,起身看看流动相。倒吸一口冷气,流动相瓶空空如也!看机器屏幕上,居然还以1ml的速度走着!赶紧设定成零,回头看计算机,摇了半天鼠标,居然跳出一个说明“致命性错误,失去数据库链接”,大概是计算机和仪器的通讯出了问题,难怪一直保持1ml的速度。坐在椅子上安静了一会,祈祷了一下上天不要把我的输液泵的石英杆搞坏—–这就彻底完蛋了。怎么办?看了半天说明书,差了半天资料也没有和头绪。书上说:流动相不足时会自动停泵。妈的,我这怎么没停啊?仔细想想,应该问题也不大,顶天密封会有些问题,根据估计,没有流动相的时间也就2个小时左右:(。想咨询下工程师,还没联系上。又仔细想想,自己解决吧。

    阅读全文…

    流式细胞术手册

    2007年6月19日 没有评论

    这是我整理的,都是确认比较成熟的办法,有需要的同学请下载!
    点此,右键另存为。

    分类: 仪器那点事 标签: ,

    东北农业大学仪器共享网介绍

    2007年5月31日 没有评论

    为了更好好的服务科研,我校制定了仪器共享计划及一系列规定,仪器共享网主要的目的是提高大型仪器设备的利用率和完好率,有效调动大型仪器设备所属单位和实验室向全校和社会开放、专管共用,提供优质服务的积极性,满足学校教学、科研对资源共享的需求,并根据教育部《高等学校仪器设备管理办法》和《东北农业大学大型仪器设备管理办法》等有关文件的精神,特制订仪器共享方案,原文地址如下。
    东北农业大学大型仪器设备开放共享有偿使用暂行方案(总 则)
    仪器共享网地址如下:
    http://gzc.neau.cn/yqsbgx/default/Default.aspx

    本单位及本人积极响应这一计划,并于今日下午,为兽医学院,利用流式细胞仪测定细胞周期和晚期调亡。由于样品前处理较好,除个别样品杂点较多外,其他数据非常好。对手医学院那位同学做细胞悬浮液的实验技能赞一个。:)

    如察看我院共享设备,请查看:
    http://gzc.neau.cn/yqsbgx/yqsb/index.aspx?sslb=7

    用流式细胞仪测定草的DNA含量

    2007年4月24日 8 条评论

    这几天一直给别人做FCM,测定几种草中的DNA含量(pg/2C),一开始还是很明白的,可是随着实验前进,慢慢我也糊涂了,两次的实验结果完全相反,我都不知道哪里错了。重新配置了所有药品,结果都和第一次不一样,可是只有第一次里面有我要的数据啊?难道传说中的偶然?

    没办法,找来文章看,确无意间发现,crop science society of amercia期刊居然可以免费下载全文,而且还是SCI索引源之一呢。详见http://crop.scijournals.org/?ck=nckhttp://www.scijournals.org/。呵呵,希望这样免费的地方越来越多。

    这次测定主要的方法来自”Determination of the level of variation in polyploidy among Kentucky Bluegrass Cultivars by Means of Flow Cytometry“.
    Introduce FCM–Flow cytometer
    Flow cytometry is an analytical technique that can be used to study many different aspects of cytology and genetics. For expample, it can be use to study the cell cycle by determining the proportions of cell in G1,S,and G2/M stages of the cell cycle, thus allowing the calulation of cell cycle times(Marie and Brown, 1993). It is also useful in performing task such as chromosome sorting and quantification of DNA content. Thus, flow cytometry enables a quick estimation of DNA amount by quantifying nuclear DNA content. Flow cytometry has the advantage fo being faster and less labor intensive than other methods of DNA content estimation, such as the microdensitometer technique and cytological chromosome counts.

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    生物的细胞周期

    2007年4月10日 没有评论

    细胞增殖需要细胞分裂,一次细胞分裂产生二个子细胞。 最明显的需要复制和分裂变成子细胞的细胞结构是细胞核,它是细胞中遗传物质DNA的贮藏室。 除极少数细胞外,一个有机体中绝大多数细胞包含数量相同的 DNA和染色体。 因此,细胞在分裂前必须复制 DNA,即各子细胞从母细胞承受相同数量的 DNA。 阅读全文…

    分类: 仪器那点事 标签: , ,

    流式细胞仪测定DNA需要注意到小问题

    2007年4月9日 没有评论

    近日DNA含量、调亡、细胞周期分析的得到的数据都不是很好,经过查阅资料,发现主要问题还在于前处理。

    1、染色问题,染色加入足量的染料.以确保样木能与染料充分结合,PI的推荐浓度至少是20 ug/ 10的6次方个细胞。染色液过量与不足,均可造成分析背景过大。
    2、由于PI也可以与RNA结合,因此应该用Rnase处理样品,一般的添加量大约是10的6次方个细胞加大约1000U的RNAase,通常将将染液和RANse配到一起,这个浓度也是要探索的,量不对,容易出现异常峰。
    3、直方图道数与一倍体细胞的G1峰位置的选择,细胞数直方图的道数值至少应为512,G峰道数应不低最大道数的五分之一即当直方图的最大道数为1 024时.G,峰的位置应该是200.直方图的最大道数为512时.G,峰的位置应为1000通过调节PMT(光电倍增管)的电压值以获得正常一倍体细胞的G峰的理想位置,这点很重要,但是问题是样品的不均一性,细胞浓度不同,导致荧光强度不同,所以出现的值很不好,所以各样本间的细胞浓度值要尽量军均一,否则不能出现想要的图像。
    4、一般来讲,收集细胞要在20000个以上,所以细胞悬浮液的量也要足够,在细胞浓度10的6次方个以上时,也大约要500微升。
    提供一个新鲜组织DNA分析的材料!右键点击后另存为, 直接点击打不开。。。。。dna analysis of application PI.pdf

    流式细胞仪真空泵震动引发的问题及解决办法

    2007年3月7日 没有评论

    流式属于负压上样,因此真空泵不工作将导致系统无法进行工作,而真空泵在工作过程中,产生震动容易对周边设备产生影响,尤其是接线板等设施,较易导致他们接触不良。具体解决办法如下:
    1、将真空泵固定螺母拧紧,减少震动。
    2、将其他设施用结实的绳索固定好,远离真空泵震动范围。
    3、选择中低速进样,可减少问题的发生。

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