以下是回答的一些问题，希望有用，如有问题，敬请提出。另外，欢迎任何人给我email咨询乳品分析方面的问题，我将竭尽所能的回答。我的email地址在这里。你要告诉我你采用的具体步骤，至少要告诉我用的哪一个标准的那一个方法，更详细的告诉我您操作中与国标有何不同。近日非常忙，邮件回复不及时见谅。
1 国标非蛋白氮含量测定方法中为什么用蔗糖做空白样？
采用凯氏定氮法测定蛋白时，有一个不可避免的问题就是那些难以消化的物质，如硝酸盐、亚硝酸盐、生物碱、吡啶、喹啉化合物、氨基比林等，这个问题在测定非蛋白氮的时候更为突出，而蔗糖具有还原性，能够把这些难以消化的氮转换成可以滴定的铵。具有还原性的物质很多，而之所以选择蔗糖，一是因为其稳定的性质，不受盐浓度和酸浓度的影响，二是蔗糖是植物提取物，含氮较低，不易造成空白值偏高的问题。除蔗糖外，还可以选择水杨酸、铬、锌、硫酸铁等具有还原性而又不影响滴定的物质。
牛奶中非蛋白氮含量受很多因素影响，牛的品种、饲料的种类（比如喂饲含三聚氰胺和高硝酸盐含量的饲料）、饲养条件、牛乳中体细胞数量影响，而且影响较大，并没有一个统一的数值。衡量非蛋白氮含量(掺假除外)，经常用非蛋白氮占总氮的比值来衡量，因为如果加上牛乳密度、干物质含量等因素就更难以得出一个稳定的数值。也就是(非蛋白氮NPN/总氮TN)这一比值，非蛋白氮占总氮的百分比，具有一定的指导意义。这个值目前比较常见的是：5.75,考虑到各种影响因素，大约从4.8%-5.8%都是可以接受的范围。
1)因为还原率的计算方法是通过还原硝酸盐的来测量的，所以，当你使用过量的的硝酸盐的时候，可能会有部分硝酸不能还原，可以降低硝酸盐的量，比如用10ml标准液进行测量，当然，后面的换算关系要变动一下。如果此时还原效率提高，说明镀铜镉粒有问题。以后可以减量测定。或者自己按照GB的方法在镉粒上电镀铜。
2)镉是起还原作用的，而铜以及铜离子在氧化还原作用中起催化作用。因此，如果铜度的量过多或者过少，都会影响还原效率。一般，镀铜镉粒应该是灰黑色的才对。
3)测定中，氨缓冲液有两个作用，一是用来去除附着在镉表面由于铜产生的沉淀，二是提供稳定的pH环境。因此，氨缓冲液的浓度及质量也很重要，测定氨缓冲液的pH，或者新配缓冲液。
4)镀铜镉粒在保存、运送过程中不能接触空气，所以你见到的一般都是放到水里的。而且在装柱过程中也不能暴露在空气中，否则影响性能。
5)镉柱装好后需用较高浓度的硝酸盐溶液进行激活，也就是标准所说的新制备柱的处理。此步骤也必须做好。
6)过柱流速的问题，什么叫做适合的流速？就是能够让溶液中的硝酸盐或者其他需要反应的物质充分接触镉粒的流速，流量和流速是一个意思，因此，如果你采用和标准一致(柱子内径和高度及镉粒的颗粒大小)的柱子，建议使用标准推荐的流速。
在GB5009.33-2010应用中，有几位同仁向我反映第三法稳定性，我没做，也可能是测定习惯问题，仅供参考。
以后我陆续把我回答的问题贴出来。
1.器皿的选择与洗涤
1．1器皿的选择
对于微量元素分析来说，所用器皿的质量以及洁净与否对分析结果至关重要。因此在选择用于保存及消化样品的器皿时，要考虑到其材料表面吸附性和器具表面的杂质等因素可能对样品带来的污染。一般来说，实验室分析测定所用仪器大部分为玻璃制品，但是由于一般软质玻璃有较强的吸附力，会将待测溶液中的某些离子吸附掉而丢失，因此试剂瓶及容器最好避免使用软质玻璃而使用硬质玻璃。另外目前微量元素分析常用的还有塑料,石英,玛瑙等材料制成的器皿，可根据测定元素的种类以及测定条件来选择适用的器皿。
1．2器皿的洗涤
容器的洁净是获得准确测定结果的保证。一般洗涤程序应为：器皿先用洗涤剂刷洗，再用自来水冲洗干净,30%硝酸浸泡48小时,然后用蒸馏水冲洗数次,最后再用超纯水浸泡24小时烘干备用.有试验证明经以上程序处理过的器具无锌﹑铜﹑铁﹑镁等元素存在。
2.水及试剂
2．1水的纯度
测定微量元素含量所用水的纯度对分析测定结果有很大影响，不纯净的水会污染待测样品影响测定结果。一般来说，使用去离子水即可满足要求，使用超纯水（电阻大于10６欧姆）或经亚沸石英蒸馏器蒸馏的新鲜双蒸水则更好。
2．2试剂及保存
在原子吸收分析中，酸试剂以硝酸﹑高氯酸和盐酸最为常用。其中浓硝酸和高氯酸为强氧化剂，常被用于样品的消解；稀盐酸则常被用于无机物样品的溶解。因为无机酸中一般都含有少量金属离子存在，因此应选择纯度较高的试剂。一般来说，各种酸试剂应使用优级纯制剂。另外，用以配制标准溶液的标准物质应选用基准试剂。总之，以选用的试剂不污染待测元素为准则。在实践中，如果在仪器灵敏度范围内检测不出待测元素吸收信号就可以使用。贮备液应为浓溶液（一般来说浓度为1000ppm的贮备液在一年内使用其结果不受影响）。标准曲线工作液因为较稀应当天使用，久放则其曲线斜率会有改变。
3．样品的前处理
样品的预处理是在进行原子吸收测定之前，将样品处理成溶液状态，也就是对试样进行分解，使微量元素处于溶解状态。样品经过预处理后才能进行原子吸收光谱测定。要使饲料样品中的微量元素处于游离状态，常用的方法有高低温灰化法﹑湿消化法﹑酸溶解法以及密封微波溶样法，下面就对各种方法作一介绍。
3．1干法灰化
饲料原料及配合饲料的预处理可采用此法。具体可分为马福炉高温灰化法和等离子体低温灰化法两种。高温灰化：即将饲料样品在高温下灼烧，使样品中含有的大量纤维素，蛋白质和油脂等有机物质分解挥发，仅留下矿物质灰分。饲料中Cu﹑Fe﹑Mn﹑Zn﹑Mg的测定方法国家标准就采用的高温干灰化法[5].高温灰化具体方法为：将过八十目筛经准确称量的风干饲料样品（一般为1.0000-3.0000g）放入洁净的瓷坩埚中，先在300℃的电热板上炭化，待无烟产生后转至马福炉中,450℃高温灼烧3-5小时（至样品白色或灰白色无炭粒为止），在干燥器内冷却后取出，然后缓慢滴加1：1盐酸或1：1硝酸5ml溶解后，无损失地转移到100ml容量瓶中，用超纯水或新鲜双蒸水定容至刻度待测，同样方法测定空白液。干灰化法的优点是适合于大批样品分析，且酸空白低，缺点是样品消化时间长﹑难以彻底消化﹑且回收率比较低（如铅﹑镉﹑锌等）。干法灰化需要掌握好灰化温度和灰化时间，最佳灰化温度和时间是确保样品灰化完全和防止元素挥发损失的关键条件,时间过短则样品分解不完全,回收率低,时间过长则易带来元素的挥发损失.400-500℃一般元素灼烧3-5小时均能回收完全，锌必须灼烧4小时以上才能解离并被盐酸提取。但应注意易挥发元素的测定如Hg﹑As﹑Se等不宜用高温灰化法[3，4]，因此法易导致元素大量丢失。另外，较好的灰助剂,如酸﹑铵盐等可加速试样的分解和提高元素的回收率,结合使用不但灰渣为白色且疏松易于溶解。低温灰化：原理是利用高频电场作用产生激发态等离子体来消化样品中的有机体[2]。具体方法是：将干燥后经准确称量的样品放在石英烧杯中，引入氧化室，用氧等离子体低温灰化使呈白色粉末状为灰化终点，灰化后的其他操作步骤同高温灰化。等离子氧低温灰化与高温灰化相比其优点在于可抑制无机成分的挥发，成分回收率比坩埚高温灰化法高，但由于等离子条件依赖于复杂的参数，因此测定重现率很低，且灰化速度慢，目前在原子吸收光谱分析中应用较少。
3．2湿法消化
饲料原料及配合饲料的前处理也可使用湿法消化，即用酸消煮来破坏有机物。湿消化法常用的酸是硝酸，高氯酸，两种酸用量比一般为10：1。在使用硝酸-高氯酸消化时一定要先将硝酸加入放置几小时或过夜，使之与样品充分混合，在电热板上硝化以后然后再加入高氯酸，以防止在硝酸分解完全后局部温度升高而导致高氯酸和有机物作用产生爆炸危险。方法如下：准确称取1.0000克风干样品于三角瓶或剀氏烧瓶中，用少量超纯水润湿后加20毫升硝酸,混匀,盖上表面皿放置过夜，置于可调电炉上低温消煮至近干,若样品未溶解完全则继续加硝酸消煮直至溶液近干为止，再加入2毫升高氯酸，加热，待冒白烟溶液未干前停止加热，将溶液无损失地转移到100毫升容量瓶中，用超纯水定容至刻度混匀待测,并作空白.
与干灰化相比，湿消化不容易损失金属元素，所需时间也较短，缺点是酸的用量大，造成较高的试剂空白。另外，也可用双氧水辅助混酸消化。双氧水在酸性介质中能在低温下分解,产生高能态的活性氧,硝酸分解产生的二氧化氮有催化氧化的能力,两者配合使用可增强混酸的氧化能力,提高反应速度,从而使样品完全分解
3．3酸溶解法
即用稀盐酸直接溶解样品。此法适用于无机物预混料或无机矿物质添加剂。国标（GB/T13885-92）微量元素预混料测定方法中采用的就是稀盐酸溶解法[5]。其方法为：将1.0000克干燥磨碎过80目筛的风干样本放在1N盐酸冲洗过的100毫升烧杯中，用自动滴定管加25ml1mol/l盐酸，搅拌30分钟后离心或过滤，上清液或滤液收集于100ml容量瓶中，用超纯水定容至刻度混匀待测，同样测空白样。
3．4密封微波溶样技术
饲料原料和配合饲料可用此法进行消解.微波消解溶样即通过样品与酸的混合物对微波能的吸收达到快速加热消解样品的目的。方法如下：准确称取1.0000克试样于聚四氟乙烯罐中，加入5.0ml硝酸和1.5ml30%双氧水，拧紧聚四氟乙烯罐盖，室温下浸泡10min后放入微波炉中。置微波炉350W功率档加热1min，450W功率档加热5min,550W5min,650W3min。冷却后开盖，将罐内溶液无损失转移至烧杯中，在电热板上于100℃左右赶酸至近干，将样品转移至100ml容量瓶中加超纯水定容，摇匀。同时做试剂空白实验。微波加热具有加热速率快效率高的优点，尤其在密闭容器中，可以在数分钟之内达到很高的温度和压力，使样品快速溶解。此外，密闭容器微波消解能避免样品中存在的或在样品消解形成的挥发性分子组分中痕量元素的损失，还能减少酸的使用量从而显著降低空白值，保证测量结果的准确性。同时，微波消解易于实行自动化，可与其他分析仪器实行连续分析。总之，密封微波溶样技术作为一种样品预处理手段，可以使样品处理更加快速准确安全，近十年来此技术在原子吸收光谱分析的样品前处理方面取得了广泛应用并具有广阔的发展前景。但密封微波溶样的条件探索和仪器的最佳设计等还有待于大量实践来确定。
氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的这一点很多用户都已经知道；但是要注意到的是：正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的，对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。
对于新购买到的柱子，首先请注意打开分析测试说明书，了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶，请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大，会导致柱压很高，适当调低流速即可。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类，建议在用分析流动相之前，先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡，这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。 阅读全文…
反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料柱等。本文重点介绍反相色谱柱的选择和使用：
一、反相色谱柱的选择
1．柱子的PH值使用范围
反相柱优点是固定相稳定，应用广泛，可使用多种溶剂。 阅读全文…
为了更好好的服务科研，我校制定了仪器共享计划及一系列规定，仪器共享网主要的目的是提高大型仪器设备的利用率和完好率，有效调动大型仪器设备所属单位和实验室向全校和社会开放、专管共用，提供优质服务的积极性，满足学校教学、科研对资源共享的需求，并根据教育部《高等学校仪器设备管理办法》和《东北农业大学大型仪器设备管理办法》等有关文件的精神，特制订仪器共享方案，原文地址如下。
东北农业大学大型仪器设备开放共享有偿使用暂行方案(总 则)
仪器共享网地址如下：
http://gzc.neau.cn/yqsbgx/default/Default.aspx
本单位及本人积极响应这一计划，并于今日下午，为兽医学院，利用流式细胞仪测定细胞周期和晚期调亡。由于样品前处理较好，除个别样品杂点较多外，其他数据非常好。对手医学院那位同学做细胞悬浮液的实验技能赞一个。:)
如察看我院共享设备，请查看:
http://gzc.neau.cn/yqsbgx/yqsb/index.aspx?sslb=7
近日DNA含量、调亡、细胞周期分析的得到的数据都不是很好，经过查阅资料，发现主要问题还在于前处理。
1、染色问题，染色加入足量的染料.以确保样木能与染料充分结合，PI的推荐浓度至少是20 ug/ 10的6次方个细胞。染色液过量与不足，均可造成分析背景过大。
2、由于PI也可以与RNA结合，因此应该用Rnase处理样品，一般的添加量大约是10的6次方个细胞加大约1000U的RNAase，通常将将染液和RANse配到一起，这个浓度也是要探索的，量不对，容易出现异常峰。
3、直方图道数与一倍体细胞的G1峰位置的选择，细胞数直方图的道数值至少应为512，G峰道数应不低最大道数的五分之一即当直方图的最大道数为1 024时.G，峰的位置应该是200.直方图的最大道数为512时.G，峰的位置应为1000通过调节PMT(光电倍增管)的电压值以获得正常一倍体细胞的G峰的理想位置，这点很重要，但是问题是样品的不均一性，细胞浓度不同，导致荧光强度不同，所以出现的值很不好，所以各样本间的细胞浓度值要尽量军均一，否则不能出现想要的图像。
4、一般来讲，收集细胞要在20000个以上，所以细胞悬浮液的量也要足够，在细胞浓度10的6次方个以上时，也大约要500微升。
提供一个新鲜组织DNA分析的材料！右键点击后另存为， 直接点击打不开。。。。。dna analysis of application PI.pdf